УСТРАНЕНИЕ ТОКСИЧЕСКИХ ЯВЛЕНИЙ ПРИ ТЕРАПИИ ЦИСПЛАТИНОМ

Среди хронических болезней человечества онкология занимает второе место в мире по смертности (после сердечно-сосудистых заболеваний). Ежегодно только в России диагностируется более 500 000 случаев заболеваний раком [1].

В практике клинической онкологии подавляющее большинство пациентов подлежат проведению лекарственной цитостатической терапии (химиотерапии) – либо как самостоятельного метода лечения, либо в комбинации с другими основными методами — хирургическим и лучевым. Противоопухолевые препараты не обладают достаточной специфичностью воздействия, поэтому каждый из цитостатиков имеет обширный спектр побочных эффектов [2,6,8,9,10,13]. Спектр токсических проявлений противоопухолевой терапии очень широк (ВОЗ классифицируют более 20 видов побочных действий противоопухолевой лучевой и химиотерапии (радиотерапии)), а степень этих проявлений может быть очень значительной, вплоть до летальной. Практически все противоопухолевые препараты обладают значительной гематологической токсичностью (поражение системы кроветворения) и гепатотоксичностью (повреждение функций печени) [3,4,6,10].

Все осложнения цитостатической терапии существенно снижают качество жизни, а некоторые (тяжелые формы гематологической токсичности, нефротоксичности и др.) представляют непосредственную угрозу для жизни пациента. Такая особенность противоопухолевой терапии остро ставит вопрос о поиске новых фармакологических средств – протекторов для профилактики и борьбы с ее токсическими проявлениями [14].

Среди всего многообразия противоопухолевых препаратов цисплатин (Ц) является одним из наиболее эффективных и часто используемых в современной онкологической практике. Однако известно, что, наряду с его высокой эффективностью при лечении многих нозологий, этот препарат обладает выраженным цитотоксическим действием на нормальные ткани [4,7,9].

Потенциальные нейтрализаторы токсических действий противоопухолевых препаратов, во-первых не должны стимулировать рост и метастазирование злокачественных опухолей и, во-вторых не должны снижать эффективность противоопухолевых препаратов. Полифенолы и активные нутриенты красного винограда представляются реальными кандидатами на роль протекторов гематотоксичности, гепатотоксичности и нефротоксичности при противоопухолевой химиотерапии [5,11,12].

В этой связи целью данной работы было проведено экспериментальное исследование токсико-протекторного действия БАД антиоксидантов “Иммортель” в отношении повреждений нормальных тканей, индуцированных противоопухолевыми препаратами.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Исследования были проведены на мышах линии С57В1/6 (массой 20-22 г.) и крысах самцах линии Wistar (массой 180-200гр) разводки вивария УкрНИИ онкологии и радиологии. В качестве опухолевых моделей использовали:

  • для мышей – карциному Льюис (модель метастазирующей опухоли), суспензию клеток которой (полученную после трипсинизации ткани опухоли по стандартной методике) инокулировали в мышцу бедра каждого животного в количестве 1×106 клеток;
  • для крыс – карциному Герена (не метастатическая опухолевая модель), суспензию клеток которой перевивали подкожно в правый бок каждого животного в количестве 2×106 клеток.

Исследование влияния БАД бальзамов “Иммортель” на рост и метастазирование карциномы Льюис у мышей, а также на систему гемопоэза у животных проводили на фоне цитостатической терапии Цисплатином и без него. Для этого животные (мыши) были разделены на 6 групп, по 50 особей в каждой, со следующей кодировкой групп: “К” (контроль), “ИК” (Иммортель-Классик), “КВ” (Красное Волшебство), “Ц” (цисплатин), “ЦИК” (цисплатин + иммортель-классик), “ЦКВ” (цисплатин + иммортель – красное волшебство). “Иммортель-Классик” (в группах “ИК” и “ЦИК”) в дозе 1мл/кг (что составляло в среднем 0,02 мл “Иммортель-Классик” на одну мышь), а “Иммортель – Red Miracle” (“Красное волшебство”) в дозе 0.1гр/кг вместе с 0,05 мл воды вводили ежедневно перорально с помощью зонда, начиная с 9-х суток после прививки опухоли в течение 2-х недель. Животных групп “К” и “Ц” в те же сроки, что и введение “Иммортель-Классик”, поили водой в объеме 0,1 мл, Цисплатин (группы “Ц”, “ЦИК” и “ЦКВ”) в дозе 0,8 мг/кг веса животного вводили через день внутрибрюшинно в 0,1 мл воды для инъекций, начиная с 11-го дня после прививки опухоли. Всего было проведено 5 инъекций. Контрольным животным группы “К” в сроки введения цисплатина внутрибрюшинно вводили 0,1 мл воды для инъекций.
На 22-е сутки после прививки опухоли определяли массу первичной опухоли (в гр) и подсчитывали количество метастазов в легких. Кроме того, оценивали массу животного (в гр) и массу селезенки (в мг).

Для изучения влияния БАД “Иммортель” на систему гемопоэза у мышей на фоне терапии Цисплатином и без него в те же сроки (22 сутки после прививки) проводили анализ костного мозга, а также определяли общее количество лейкоцитов и клеточный состав периферической крови мышей с привитой карциномой Льюис.

Для анализа цитограмм готовили мазки костного мозга из бедренной кости мышей каждой исследуемой группы. Фиксацию и окраску препаратов проводили общепринятым методом: фиксация эозином-метиловым по Май-Грюнвальду в течение 3 минут в стандартном растворе и далее окраска по Романовскому-Гимза на деионизированной воде в течение 8 минут с последующим промыванием водой. Цитограммы анализировали под микроскопом. Все количественные показатели выражали в процентах.

Кровь для подсчета лейкоцитов брали из кончика хвоста мыши меланжерным методом. Счет проводили в 100 больших квадратах счетной камеры Горяева с дальнейшим перерасчетом количества лейкоцитов в 1 мл по формуле: У = (сумма в 100 квадратах X 50) / 1000. Подсчет форменных элементов проводили в мазках периферической крови из кончика хвоста мышей, предварительно окрашенных по Паппенгейму-Крюкову. Лейкоцитарную формулу рассчитывали на 200 лейкоцитов.

Исследование влияния БАД “Иммортель” на рост карциномы Герена, а также на функции почек и печени у крыс проводили на фоне цитостатической терапии Цисплатином и без нее. Для этого животные (крысы) были разделены на 6 групп, так же по 50 особей в каждой, с кодировкой групп, аналогичной группам мышей.
“Иммортель-Классик” (группы “ИК” и “ЦИК”) применяли в дозе 1.0мл/кг (что составляло в среднем 0.2мл “Иммортель-Классик” на одну крысу), а “Иммортель – Red Miracle” (“Красное волшебство”) в группах “ИКВ” и “ЦКВ” в дозе 0.2гр/кг вместе с 0,25 мл воды вводили ежедневно перорально с помощью зонда, начиная с 8-х суток после прививки опухоли в течение 2-х недель. Животных групп “К” и “Ц” в те же сроки, что и введение “Иммотель-Классик”, поили водой в объеме 0,5 мл. Цисплатин (группы “Ц” и “ЦИК”) в дозе 1,2 мг/кг веса животного вводили через день внутрибрюшинно в 0,5 мл воды для инъекций, начиная с 8-го дня после прививки опухоли. Всего было проведено 5 инъекций цисплатина. Контрольным животным группы “К” в сроки введения цисплатина внутрибрюшинно вводили 0,5 мл воды для инъекций.
На 20 сутки после перевивки у всех животных определяли массу печени, селезенки и почек. Объем опухоли карциномы Герена вычисляли по формуле: V = a*b*c*pi/6, где а, b, с- ортогональные размеры опухоли.

Для оценки влияния вводимых веществ на рост опухоли использовали процент торможения ее роста (D %), который вычисляли по формуле: D=(Vo-Vi)/Vo-100, где Vo – объем опухоли контрольных животных («К»); Vi – объем опухоли животных, получавших Цисплатин, либо БАД Иммортель, либо их комбинацию.

В эти же сроки проводили анализ функции печени (определяя активность аланин-аминотрансферазы в сыворотке крови) и функции почек (определяя содержание мочевины в сыворотке крови).

Активность аланин-аминотрансферазы определяли по методу Райтмана-Френкеля. Содержание мочевины определяли при помощи диацетилмонооксима. Принцип этого метода заключается в том, что мочевина образует с диацетилмонооксимом (в присутствии ионов FeIII и тиосемикарбазида) комплекс красного цвета, по интенсивности окраски которого определяют ее концентрацию. Активность фермента выражали в мкмолях пировиноградной кислоты/час на 1 мл сыворотки. Содержание мочевины выражали в ммолях на 1 л сыворотки.
Статистический анализ полученных данных проводился с использованием t-критерия Стьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Проведенные исследования показали, что как БАД “Иммортель-Классик“,так и БАД “Иммортель – Red Miracle” не только не стимулируют рост и метастазирование карциномы Льюис у мышей, но и помогают подавлять эти процессы.

Влияние БАД ИММОРТЕЛЬ на физиологические и патофизиологические показатели мышей линии С57В1/6 с привитой карциномой легкого Льюис
Код группы
Масса
Количество метастазов в легких
Животного (г)
Селезенки (мг)
Опухоли (г)
“К”
22.3±0.4
175.3±9.6
3.34±0.36
17.9 ± 3.3
“ИК”
22.8±0.4
141.1±9.3
1.09±0.09
6.2 ± 0.95
“ИКВ”
22.9±0.4
140.1±9.2
1.04±0.10
5.9 ± 0.91
“Ц”
21.8±0.38
202.1±9.3
3.48±0.43
11.3±1.9
“ЦИК”
22.5±0.39
143.2±8.9
2.42±0.17
10.9±1.5
“ЦКВ”
22.6±0.4
140.3±9.2
2.39±0.18
10.4±1.5

Результаты эксперимента статистически достоверно показывают уменьшение массы пухоли в группе животных, получавших только БАД Иммортель (р < 0.001, при сравнении групп “ИК” и “ИКВ” с группой “К”), и в группах “ЦИК” и “ЦКВ” на фоне комплексной терапии (р < 0.05, при сравнении с группой “Ц”). Применение БАД Иммортель приводит к достоверному (р < 0.01) уменьшению и количества метастазов в легких. На фоне цитостатической терапии Цисплатином БАД Иммортель в меньшей степени влияет на количество метастазов в легких у подопытных животных.

Таким образом в рамках проведенных исследований БАД Иммортель подавлял рост и метастазирования карциномы Льюис и усиливал эффективность проводимой цитостатической терапии Цисплатином.

Прием БАД Иммортель животными так же положительно влияло на вес селезенки – орган, играющий важную роль в системе гемопоэза. Введение БАД Иммортель животным, получавшим противоопухолевый препарат, приводит к достоверному (р < 0.001) и значительному (более чем на 30%) снижению веса селезенки вплоть до величин, соответствующих весу этого органа у здоровых животных.

Влияние БАД Иммортель на систему гемопоэза у мышей с карциномой Льюис на фоне химиотерапии цисплатином и без нее.

Результаты исследования клеточного состава костного мозга (играющего основную роль в кроветворении и являющегося объектом цитотоксического действия противоопухолевой химиотерапии) представлены в таблице:

Состав (выраженный в %) клеточных элементов костного мозга у мышей линии С57В1/6 с привитой карциномой легкого Льюис после окончания лечения
Клеточные элементы
Исслебуемые группы животных
“К”
“ИК”
“ИКВ”
“Ц”
“ЦИК”
“ЦКВ”
Промиелоциты
4.2±0.2
3.67±0.73
3.61±0.57
6.6±0.49
5.6±0.19
5.2±0.2
Миелоциты
7.3±1.2
9.77±1.49
9.82±0.44
9.8±0.77
8.16±0.2
8.23±0.21
Метамиелоциты
11.6±0.5
12.5±0.39
12.6±0.41
13.5±0.68
15.4±0.4
15.6±0.38
Палочкоядерные лейкоциты
18.5±1.2
15.1±0.35
14.9±0.33
20.2±0.45
14.1±1.73
13.9±1.34
Сегментоядерные лейкоциты
21.6±0.3
12.8±0.37
12.5±0.39
21.1±0.47
14.2±2.54
13.6±0.49
Моноциты
2.6±0.45
5.6±0.45
5.9±0.44
4.75±0.23
6.1±1.21
6.3±0.42
Лимфоциты
11.6±0.71
8.6±1.19
8.3±0.97
4.1±0.59
7.8±0.54
8.5±0.65
Эритробласты
0.5±0.17
17.2±0.42
17.4±0.41
1.3±0.19
9.8±0.89
10.1±0.85
Полихроматофильные нормоциты
9.1±0.61
6.2±0.21
6.1±0.19
6.3±0.42
6.6±0.27
6.8±0.23

Анализ цитограмм костного мозга мышей линии С57В1/6 после химиотерапии Цисплатином метастатической карциномы Льюис выявил нарушения в дифференциации всех ветвей кроветворения, что особенно выражалось в гиперплазии незрелых нейтрофильных лейкоцитов и в угнетении пролиферации клеток эритроидного ряда. Появление в костном мозге подопытных животных низкодифференцированных лейкоцитов свидетельствует о повышении пролиферации гранулоцитарного ряда. Об этом свидетельствует достоверное повышение уровня миелоцитов и метамиелоцитов – по сравнению с показателями их в контрольной группе. При этом уровень моноцитов увеличился в 2 раза, что свидетельствует об усилении фагоцитарной активности, вызванной существенным количеством погибших клеток. Введение Цисплатина приводит к статистически достоверному (р < 0.001) более чем 2-кратному снижению уровня лимфоцитов. Отмеченное нами достоверное, более чем 30% угнетение эритроидного ряда кроветворения в этой группе животных (см. полихроматофильные нормоциты) совпадает с данными литературы о способности Цисплатина тормозить дифференциацию клеток эритроидного ряда кроветворения.

Цитоморфологический анализ миелограм костного мозга мышей после терапии ЦП в сочетании с БАД Иммортель выявил достоверную (р < 0.0001) и существенную стимуляцию эритроидного ряда гемопоэза. Эта стимуляция проявляется практически в 7-кратном увеличении уровня эритробластов. Однако, следует отметить, что уровень полихроматофильных нормоцитов остается сниженным по сравнению с контрольными животными.
Введение БАД Иммортель обеспечивает также тенденцию к нормализации уровня лимфоцитов, статистически достоверно (р < 0.05) повышая их уровень (снижение которого индуцировано введением Цисплатина) практически в 2 раза.

В группе животных, где применялся только БАД Иммортель, характер миелограмм костного мозга был в большинстве своем аналогичен картине костного мозга контрольных животных. Так, БАД Иммортель не оказывает (или оказывает слабое) влияние на уровень промиелоцитов, миелоцитов и метамиелоцитов костного мозга. Его введение достоверно увеличивает (по сравнению с контрольными животными) уровень моноцитов на фоне значительного и статистически достоверного снижения нейтрофильной фракции лейкоцитов – палочкоядерных и сегментоядерных лейкоцитов. Как и после действия Цисплатина в сочетании с БАД Иммортель отмечается повышение уровня эритробластов. Однако, в отличие от животных групп “ЦИК” и “ЦКВ”, это повышение происходит на фоне понижения уровня полихроматофильных нормоцитов.

Полученные данные свидетельствуют о том, что БАД Иммортель положительно влияет на эритроидную ветвь кроветворения, а также на гранулоцитарный ряд – процентное соотношение незрелых форм к зрелым клеткам смещается в сторону незрелых форм.

Наблюдаемые нами изменения миелограмм костного мозга мышей с карциномой Льюис, вызванные введением или Цисплатина, или БАД Иммортель, или их комбинацией, нашли свое подтверждение и при исследовании элементного состава периферической крови этих животных. Общее количество лейкоцитов периферической крови контрольной группы мышей с привитой карциномой Льюис на 33% выше верхней границы нормы здоровых мышей, что связано с наличием злокачественной опухоли у мышей. Относительное количество разных форменных элементов лейкоцитарного ряда не отличается от здоровых животных, в то же время есть тенденция к увеличению абсолютного количества моноцитов периферической крови мышей с привитой карциномой Льюис.

Введение БАД Иммортель приводят к достоверному увеличению количества лейкоцитов периферической крови на 57%. При анализе лейкоцитарной формулы установлено, что наблюдаемый лейкоцитоз обусловлен абсолютным лимфоцитозом (р < 0.05). Так как уровень лимфоцитов в миелограмме костного мозга мышей этой группы незначительно ниже, чем у контрольных животных, то индуцированный БАД Иммортель лимфоцитоз прямо связан с кроветворной функцией селезенки, тенденцию к увеличению которой мы наблюдали у мышей, получавших один БАД Иммортель. У животных групп “ИК” и “ИКВ” также наблюдается тенденция к увеличению абсолютного количества моноцитов, однако это увеличение носит статистически недостоверный характер. Необходимо отметить уменьшение ацидофилоцитов (р < 0.01), количество которых, однако, не выходит за пределы физиологических норм здоровых животных.

Проведенные исследования показали, что при совместном введении БАД Иммортель с Цисплатином уровень лейкоцитов у животных достоверно (р < 0.01) выше (в среднем на 37%), чем у животных после инъекций одного противоопухолевого препарата. Так как нами было показано, что БАД Иммортель не снижает эффективность противоопухолевой химиотерапии Цисплатином, наблюдаемое повышение общего количества лейкоцитов периферической крови животных, получавших Цисплатин и Иммортель, указывает на выраженное гемопротекторное действие БАД Иммортель. Отметим, что нормализация Иммортелем уровня лейкоцитов на фоне цитостатической терапии Цисплатином связана с увеличением как лимфоцитарной, так и нейтрофильной фракции лейкоцитов. При этом изменения лимфоцитарной фракции скорее обусловлены увеличением уровня этих клеток в костном мозге.

Для мазков периферической крови животных, получавших только БАД Иммортель или Иммортель с Цисплатином, характерны также незначительные явления анизоцитоза и анизохромии. Подобные состояния характеризуют практически все анемические состояния и могут являться показателем регенерации костного мозга. Это подтверждается также данными анализа миелограмм костного мозга животных указанных групп, в рамках которых наблюдается значительное повышение уровня эритробластов при сниженном уровне полихроматофильных нормоцитов. Следует отметить, что у животных, получавших Цисплатин с Иммортелем есть тенденция к повышению количества кровяных телец с появлением больших обрывков цитоплазмы метакариоцитов.

Литературный контроль в исследованиях – лейкоцитарная формула безопухолевых интактных животных

Влияние БАД Иммортель на рост карциномы Герена у крыс на фоне химиотерапии цисплатином и без нее.

Проведенные исследования показали, что БАД Иммортель не стимулировал рост карциномы Герена у подопытных крыс. При введении только Иммортеля наблюдается статически достоверная тенденция к подавлению роста опухоли.

Влияние БАД ИММОРТЕЛЬ на рост карциномы Герена и некоторые физиологические характеристики крыс линии Wistar на фоне терапии Цисплатином и без нее
Код группы
Масса
Объем опухоли (см3)
Печени (г)
Почек (мг)
Селезенки (г)
“К”
11.1±0.9
1.5±0.1
1.48±0.1
37.9 ± 2.1
“ИК”
11.3±0.4
1.4±0.11
2.13±0.09
31.6 ± 3.95
“ИКВ”
10.2±0.4
1.4±0.12
2.07±0.10
25.9 ± 2.91
“Ц”
11.4±0.42
1.7±0.11
2.23±0.15
5.83±1.8
“ЦИК”
9.7±0.33
1.9±0.07
1.57±0.12
2.05±0.36
“ЦКВ”
9.64±0.32
1.8±0.07
1.52±0.12
1.97±0.33

 

Влияние БАД Иммортель на функцию почек и печени крыс линии Wistar с карциномой Герена на фоне терапии Цисплатином и без нее
Код группы
Содержание мочевины ммоль/л
Активность АЛТ мкмоль ПВК/час/мл
“К”
12.8±0.77
1.66±0.04
“ИК”
12.8±0.94
1.71±0.03
“ИКВ”
12.7±0.89
1.69±0.03
“Ц”
21.2±0.96
1.64±0.02
“ЦИК”
14.1±0.98
1.83±0.12
“ЦКВ”
13.9±0.97
1.81±0.11

На фоне цитостатической терапии Цисплатином, БАД Иммортель обусловливает статистически достоверное (р < 0.001) более чем 3х-кратное уменьшение объема карциномы Герена по сравнению с единственным действием противоопухолевого препарата. При этом процент торможения роста опухоли в результате введения Цисплатина в комбинации с БАД Иммортель составлял 96%, что существенно выше, чем процент торможения опухоли, обусловленный введением одного Цисплатина (84%).

Следует отметить, что применение БАД Иммортель обусловливает изменения массы селезенки у крыс, закономерность которых аналогична наблюдаемым у мышей. В отличие от мышей эти закономерности у крыс носят статистически достоверный характер. Так, введение или Иммортеля, или Цисплатина приводит к статистически достоверному (р < 0.05) увеличению массы селезенки (на 20% и 80% соответственно для животных групп “ИК”, “ИКВ” и “Ц”). Между тем БАД Иммортель при совместном введении с Цисплатином нормализует массу этого органа, достоверно снижая массу селезенки на 45% по сравнению с группой животных, получавших только Цисплатин.

Влияние Иммортеля на функциональное состояние почек и печени у крыс с карциномой Герена на фоне химиотерапии цисплатином и без нее.

Проведенные исследования показали, что БАД Иммортель не ухудшает функциональное состояние печени как на фоне введения Цисплатина, так и без него. Этот вывод подтверждается отсутствием достоверных изменений в активности АЛТ у крыс исследуемых групп. Также не отмечено существование достоверных отличий в массе печени между различными группами животных.

Важным результатом проведенных исследований явилось нефропротекторное действие БАД Иммортель. Известно, что среди всего спектра токсических действий Цисплатина нефротоксичность является основной и по частоте встречаемости, и по степени выраженности [7,14]. Так, более чем у 65% больных введение Цисплатина в эффективных терапевтических дозах (более 50 мг/м2) приводит к значительным поражениям функции почек. В рамках наших исследований введение Цисплатина крысам приводило почти к 2-кратному (статистически достоверному, р < 0.01) увеличению уровня мочевины в сыворотке крови, что однозначно указывает на значительное поражение этого органа противоопухолевым препаратом. Введение БАД Иммортель на фоне Цисплатина достоверно (р < 0.05) снижает уровень мочевины в сыворотке крови крыс на 32%, оказывая нормализующее действие на функциональное состояние почек.

ВЫВОДЫ

Проведенные исследования и анализ полученных результатов позволяют сделать следующие выводы:

  • Иммортель противодействует росту и метастазированию карциномы Льюис у мышей и карциномы Герена у крыс.
  • Применение БАД Иммортель на фоне цитостатической терапии Цисплатином как минимум не снижает эффективность противоопухолевой терапии у мышей и статистически достоверно повышает эффективность лечения карциномы Герена у крыс.
  • Иммортель проявляет гематопротекторные свойства, нормализуя уровень лейкоцитов у мышей на фоне терапии Цисплатином.
  • Применение БАД Иммортель значительно стимулирует эритроидную ветвь кроветворения у мышей.
  • БАД Иммортель улучшает функцию печени как у крыс, получавших Цисплатин, так и у животных без противоопухолевой терапии.
  • БАД Иммортель при комбинированном введении с Цисплатином оказывает выраженное нефропротекторное действие, снижая степень поражения почек, вызванного действием цитостатика.

Таким образом, полученные результаты позволяют сделать общий вывод о перспективности использования БАД Иммортель в онкологической практике для профилактики и коррекции побочных реакций цитостатической противоопухолевой терапии.

ЛИТЕРАТУРА

  1. Гуслицер Л.Н. Эпидемиология опухолей: основные результаты исследований, проведенных в институте экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им.Р.Е.Кавецкого НАН Украины// Эксперим. Онкология. – 2001. – Т.23 (3). – С.229-235.
  2. Соляник Г.И., Кулик Г.И. Противоопухолевая терапия. Вспомогательная информация// Медикаментозное лечение онкологических больных.-К.: Геопринт.-1999.-С.273-339.
  3. Breidenbach M., Rein D.T., Schondorf Т., Schmidt Т., Konig E., Valter M., Kurbacher CM. Hematological side-effect profiles of individualized chemotherapy regimen for recurrent ovarian cancer// Anticancer Drugs. – 2003.-V.14 (5).-341-346.
  4. Cersosimo RJ. Hepatotoxicity associated with cisplatin chemotherapy// Ann. Pharmacother. -1993. – V.27(4).-P.438-441.
  5. Das D.K., Sato M., Ray P.S., Maulik G., Engelman R.M., Bertelli A.A., Bertelli A. Cardioprotection of red wine: role of polyphenolic antioxidants// Drugs Exp. Clin. Res. – 1999. -V.25 (2-3). -P.115-120.
  6. Jefford M., Michael M., Rosenthal M.A., Davis I.D., Green M., McClure В., Smith J., Waite В., Zalcberg J. A novel combination of cisplatin, irinotecan, and capecitabine in patients with advanced cancer// Invest. New Drugs. – 200f – V.22 (2). – P.185-192.
  7. Kern W., Braess J., Kotschofsky M, Samel S., Becker H., Hiddemann W., Schleyer E. Application of cisplatin as intraoperative hyperthermic peritoneal lavage (IHPL) in patients with locally advanced gastric cancer: analysis of pharmacokinetics and of nephrotoxicity// Anticancer Res. – 2002. – V.22 (5). – P.3099-30102.
  8. Kintzel P.E. Anticancer drug-induced kidney disorders// Drug Saf. – 2001. – V.24. – P.19-38.
  9. Ludwig Т., Riethmuller C, Gekle M., Schwerdt G., Oberleithner H. Nephrotoxicity of platinum complexes is related to basolateral organic cation transport// Kidney Int. – 2004. – V.66 (1). – P. 196-202.
  10. Markman M., Webster K., Zanotti K., Kulp В., Peterson G., Belinson J. Phase 2 trial of prolonged administration of oral topotecan in platinum/taxanerefractory ovarian, fallopian tube, and primary peritoneal cancers// Gynecol. Oncol. – 2004. – V.95 (1). – P. 109-113.
  11. Mitjans M, del Campo J, Abajo C, Martinez V, Selga A, Lozano C, Torres JL, Vinardell MP.Immunomodulatory activity of a new family of antioxidants obtained from grape polyphenols//J. Agric. Food Chem. – 2004. – V.52 (24). – P.7297-7299.
  12. Rodrigo R., Castillo R., Carrasco R., Huerta P., Moreno M. Diminution of tissue lipid peroxidation in rats is related to the in vitro antioxidant capacity of wine// Life Sci. – 2005. – V.76 (8). – P.889-900.
  13. Schimmel K.J., Richel D.J., van den Brink R.B., Guchelaar H.J. Cardiotoxicity of cytotoxic drugs// Cancer Treat. Rev. – 2004. – V30 (2). – P.181-191.
  14. Solyanik G.I., Todor I.N., Ponomareva O.V., Banakhevich N. V, Terzov A.I., Chekhun V.F. Reduction of cisplatin-induced nephrotoxicity by proteolytic enzymes in tumor-bearing rats// Int. J. himunotherapy.